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      實驗簡介買此服務(wù)買試劑盒

      RNA pull down * 實驗簡介


      RNA pull down是體外條件下尋找目標(biāo)RNA的結(jié)合蛋白的方法。先將體外轉(zhuǎn)錄的RNA結(jié)合到Beads上,再將RNA-Beads和細(xì)胞裂解液孵育,這樣與目標(biāo)RNA結(jié)合的蛋白便會一起吸附在Beads上。洗滌掉不結(jié)合的蛋白后,用洗脫液將RNA-protein復(fù)合物從Beads洗脫下來,之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測特定的結(jié)合蛋白,還可以采用質(zhì)譜方法鑒定與目標(biāo)RNA結(jié)合的未知蛋白。



      輝駿生物10年科研服務(wù)經(jīng)驗,專業(yè)提供分子互作實驗服務(wù),包括蛋白與蛋白、蛋白與DNA、蛋白與RNA、RNA與RNA的相互作用技術(shù),經(jīng)驗豐富,實驗結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

      我公司自有分子、細(xì)胞和質(zhì)譜實驗平臺,能執(zhí)行最優(yōu)的實驗路線,對微量互作蛋白的質(zhì)譜鑒定有充足把控力,對后續(xù)功能分析有獨到見解。

      我們不僅會提供專業(yè)的售前方案建議、而且售后技術(shù)支持將一直保持到文章發(fā)表,確保您安心進(jìn)行下游實驗及投稿。

      目前,客戶已在Signal Transduction and Targeted Therapy (IF: 52.7)、Journal of Hematology & Oncology (IF: 40.4)、European Heart Journal (IF: 35.7)、Molecular Cancer (IF: 33.9)、Cell Discovery (IF: 33.5)、Nature Methods (IF: 32.1等高水平期刊成功發(fā)表大量高分文章(點擊查看客戶文獻(xiàn))



      RNA pull down * 實驗流程


      RNA pull down,rna pull-down實驗原理和步驟



      RNA pull down * 應(yīng)用背景


      RNA結(jié)合蛋白(RNA binding protein,RBP)是一類功能強大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細(xì)胞編碼的所有蛋白的5%~10%。目前除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨發(fā)揮功能,大部分RNA通過與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來發(fā)揮作用。  


      一方面,RBP參與RNA合成、可變剪接、修飾、轉(zhuǎn)運、翻譯及胞內(nèi)定位等多個轉(zhuǎn)錄后調(diào)控過程,調(diào)控mRNA穩(wěn)定性、lncRNA活性、miRNA沉默復(fù)合體形成等生物學(xué)過程;另一方面,RNA也會調(diào)節(jié)這些蛋白質(zhì)的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用,從而影響RBP介導(dǎo)的各種細(xì)胞事件。RNA與蛋白質(zhì)的相互作用對于維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)是非常重要的,干擾這種相互作用將會導(dǎo)致細(xì)胞功能失調(diào)和相關(guān)疾病的發(fā)生。  


      目前研究RNA-蛋白質(zhì)相互作用的方法分為兩大類:一是以感興趣的RNA為中心,尋找與該RNA結(jié)合的蛋白質(zhì);二是以感興趣的蛋白質(zhì)為中心,尋找與該蛋白質(zhì)結(jié)合的RNA。RNA pull down屬于前者,通過體外轉(zhuǎn)錄的方式將感興趣的RNA帶上標(biāo)簽,通過該標(biāo)簽使RNA結(jié)合到樹脂支持物上,再加入樣本蛋白質(zhì)與RNA結(jié)合,洗滌、洗脫得到與目標(biāo)RNA結(jié)合的蛋白質(zhì)。

      技術(shù)支持聯(lián)系
      18927549347、13430303037



      RNA pull down * 輝駿服務(wù)內(nèi)容


      服務(wù)項目服務(wù)內(nèi)容結(jié)果交付實驗周期客戶提價格

      RNA pull down WB

      (驗證型)

      制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖3-4周

      實驗樣本

      目標(biāo)基因質(zhì)粒模板

      待測蛋白抗體

      實驗信息表


      點擊詢價
      Western blot檢測樣本中的待測蛋白Western blot檢測圖

      RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

      RNA pull down實驗報告

      Western blot檢測

      RNA pull down MS

      (篩選型)

      制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖5-6周

      實驗樣本

      目標(biāo)基因質(zhì)粒模板

      實驗信息表



      點擊詢價


      RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

      SDS-PAGE銀染檢測圖

      RNA pull down實驗報告

      LC-MS/MS檢測及數(shù)據(jù)分析

      質(zhì)譜檢索結(jié)果及報告

      互作蛋白篩選表格

      生信分析結(jié)果和報告



      RNA pull down * 樣本要求



      樣本類型
      RNA pull down WB建議送樣量RNA pull down MS建議送樣量
      動物細(xì)胞
      3*10e7個細(xì)胞/組(約3個10cm皿)5*10e7個細(xì)胞/組(約5個10cm皿)
      動物組織1g/組2g/組
      植物葉片2g/組4g/組
      植物根或果實4g/組8g/組
      菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組

      ▲注意:以上均為每組樣本的送樣量,如果實驗和對照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細(xì)送樣指南可聯(lián)系輝駿生物索取。

      保存及運輸:-80℃保存,干冰取樣/運輸,至少在送樣前2天通知我司。



      RNA pull down * 結(jié)果示例


      RNA pull down檢測圖.jpg

      左:RNA pull down WB檢測圖(陽性);    右:RNA pull down MS產(chǎn)物銀染圖


      RNA pull down MS質(zhì)譜結(jié)果.png

      RNA pull down MS質(zhì)譜檢索表格(部分展示)


      RNA pull down生信分析結(jié)果.jpg

      正義鏈組獨有蛋白(潛在結(jié)合蛋白)的生物信息學(xué)分析結(jié)果(部分展示)


      技術(shù)支持聯(lián)系
      18927549347、13430303037



      RNA pull-down 服務(wù)案例—客戶文章解析


      The lncRNA LAMP5-AS1 drives leukemia cell stemness by directly modulating DOT1L methyltransferase activity in MLL leukemia. 

      Journal of Hematology & Oncology. 2020. (中科院1區(qū),IF=23.168)


      lncRNA LAMP5-AS1通過調(diào)控DOT1L甲基轉(zhuǎn)移酶活性促進(jìn)MLL白血病發(fā)展


      研究概述

      大量的臨床樣本檢測發(fā)現(xiàn),一個長鏈非編碼RNA(LncRNA)“LAMP5-AS1”在混合系白血病(MLL)中高表達(dá),因此研究者們繼續(xù)探索了它在MLL中的的作用機制。通過RNA pull down和RIP-qPCR技術(shù),他們發(fā)現(xiàn)了LAMP5-AS1的潛在結(jié)合蛋白—DOT1L(一種H3K79甲基轉(zhuǎn)移酶),并通過ChIP-seq和ChIP-qPCR實驗證明LAMP5-AS1能夠影響MLL融合蛋白核心靶基因的H3K79me2/3水平。本研究確定了lncRNA LAMP5-AS1在MLL白血病細(xì)胞的自我更新和分化阻滯中起重要的作用,對維持DOT1L酶的高活性有重要意義,可能成為治療MLL白血病的一個有價值的靶點。


      研究路線

      細(xì)胞和小鼠實驗確定高表達(dá)的LAMP5-AS1促進(jìn)MLL白血病進(jìn)展
      RNA pull-down結(jié)合質(zhì)譜鑒定技術(shù)首次發(fā)現(xiàn)了LAMP5-AS1的潛在結(jié)合蛋白—DOT1L(一種H3K79甲基轉(zhuǎn)移酶)
      RIP qPCR實驗確定了LAMP5-AS1與DOT1L結(jié)合
      截短型 RNA pull down實驗進(jìn)一步明確了與LAMP5-AS1結(jié)合的DOT1L結(jié)構(gòu)域
      體外酶活實驗表明LAMP5-AS1與DOT1L的結(jié)合促進(jìn)了DOT1L的甲基轉(zhuǎn)移酶活性
      ChIP實驗表明LAMP5-AS1影響MLL融合蛋白核心靶基因的H3K79me2/3水平
      臨床分析LAMP5-AS可作為MLL白血病不良預(yù)后的預(yù)測因子




      RNA pull-down * 客戶文章


      1. Bao. X.C. et al: The p53-induced lincRNA-p21 derails somatic cell reprogramming by sustaining H3K9me3 and CpG methylation at pluripotency gene promoters. Cell Research, 2015. 中科院1區(qū),IF=46.297.

      【研究內(nèi)容】:作者通過RNA pull-down、RIP-qPCR、CoIP等技術(shù),證實了lincRNA-p21與HNRNPK結(jié)合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成復(fù)合物。該復(fù)合物甲基化了多能性基因的啟動子序列及相應(yīng)組蛋白,并改變了它們的表達(dá)量,從而進(jìn)一步影響體細(xì)胞重編程過程。

      使用相關(guān)技術(shù):RNA pull-down



      2. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA. Nature Methods, 2018. 中科院1區(qū),IF=47.99.
      【研究內(nèi)容】:輝駿生物為作者單位之一,和客戶共同開發(fā)了一種全新的RNA pull down,并用質(zhì)譜鑒定新生RNA結(jié)合蛋白的方法。該方法主要是用EU標(biāo)記新生RNA,再用點擊反應(yīng)-生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)做RNA-pull down,然后質(zhì)譜鑒定分離的新生RNA互作蛋白。用該rna pulldown方法,首次鑒定到重要周期蛋白CCK1為RNA結(jié)合蛋白。RIP-qPCR、CLIP-Seq等實驗進(jìn)一步證實了CCK1為RBP蛋白,并發(fā)揮著重要的細(xì)胞。
      使用相關(guān)技術(shù):RNA pull down WB、RNA pull-down 技術(shù)服務(wù)


      3. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. Oncogene, 2020. 中科院1區(qū),IF=8.756.
      【研究內(nèi)容】:lncRNA LINC01503在鼻咽癌中高表達(dá),并且促進(jìn)了腫瘤的不良預(yù)后。作者在此探討了LINC01503的作用機理,先用RNA pull down和質(zhì)譜鑒定,發(fā)現(xiàn)SFPQ蛋白可能和LINC01503結(jié)合。RIP-qPCR實驗確證了鼻炎癌中LINC01503募集了SFPQ基因。基于SFPQ-FOSL1軸在癌癥研究中的重要地位,作者后續(xù)的工作思路之一也是關(guān)注該信號軸,并設(shè)計了CHIP-qPCR等實驗做出證明。RNA pull down配合質(zhì)譜鑒定,為此文研究提供了關(guān)鍵性的研究源頭。
      使用相關(guān)技術(shù)RNA pulldown實驗、rna-pull down 打質(zhì)譜




      RNA pull-down * 輝駿服務(wù)優(yōu)勢

      1

      十年服務(wù)經(jīng)驗,客戶成果發(fā)表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。

      2

      對圍繞RNA結(jié)合蛋白開展的整體課題提供全方位指導(dǎo),包括上下游實驗設(shè)計和結(jié)合蛋白的多方法驗證等。

      3

      自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺,對RNA pull down產(chǎn)物這類微量蛋白的質(zhì)譜鑒定有十足的把控能力,對后續(xù)的生物信息分析有獨到的見解

      4

      售后技術(shù)支持將一直保持到客戶發(fā)表文章,確保客戶安心進(jìn)行下游實驗及投稿。



      F2 RNA pulldown試劑盒/RNA pulldown試劑盒-強親和力/蛋白調(diào)取好-輝駿生物專業(yè)試劑盒供應(yīng)商



      輝駿實力

      輝駿DNA-pull down實驗技術(shù)外包服務(wù)


      輝駿生物RNA-pull down實驗技術(shù)服務(wù)分以下兩種:


      1. RNA pull down WB,用于檢測目標(biāo)RNA與某樣本中的待測蛋白是否存在相互作用;

      2. RNA pull down MS,用于篩選目標(biāo)RNA與某樣本中的哪些蛋白具有相互作用。


      RNA Pull down檢測服務(wù)
      服務(wù)項目服務(wù)內(nèi)容結(jié)果交付實驗周期客戶提價格
      RNA pull down WB制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖3-4周

      1、實驗樣本

      2、含有目標(biāo)基因序列的質(zhì)粒模板及測序文件

      3、待測蛋白抗體

      4、實驗信息表(樣本信息、抗體信息、目標(biāo)RNA和待測蛋白序列)



      點擊詢價
      Western blot檢測待測樣本中的待測蛋白Western blot檢測圖

      RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

      (2組:正義鏈孵育組、反義鏈孵育組)
      RNA pull down實驗報告
      Western blot檢測RNA Pull down產(chǎn)物中的待測蛋白Western blot檢測圖
      RNA pull down MS制備RNA正義鏈和反義鏈探針探針電泳圖5-6周

      1、實驗樣本

      2、含有目標(biāo)基因序列的質(zhì)粒模板及測序文件

      3、實驗信息表(樣本信息、目標(biāo)RNA序列)




      點擊詢價


      RNA pull down捕獲目標(biāo)RNA及其結(jié)合蛋白

      (2組:正義鏈孵育組、反義鏈孵育組)
      pull down實驗報告
      SDS-PAGE評估RNA pull down產(chǎn)物中的蛋白含量和數(shù)量SDS-PAGE銀染檢測圖
      LC-MS/MS定性檢測pull down產(chǎn)物的蛋白、篩選實驗組獨有蛋白(潛在互作蛋白)質(zhì)譜檢索表格、互作蛋白篩選表格、檢測報告
      針對互作蛋白做生物信息學(xué)分析(GO、KEGG pathway、String)生物信息學(xué)分析結(jié)果和報告1周


      添加技術(shù)員微信了解服務(wù)詳情
      18927549347、13430303037





      RNA pull-down服務(wù)優(yōu)勢*輝駿生物


      1

      十年服務(wù)經(jīng)驗,客戶成果發(fā)表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。

      2

      對圍繞RNA結(jié)合蛋白開展的整體課題提供全方位指導(dǎo),包括上下游實驗設(shè)計和結(jié)合蛋白的多方法驗證等。

      3

      自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺,對RNA pull down產(chǎn)物這類微量蛋白的質(zhì)譜鑒定有十足的把控能力,對后續(xù)的生物信息分析有獨到的見解。

      4

      售后技術(shù)支持將一直保持到客戶發(fā)表文章,確??蛻舭残倪M(jìn)行下游實驗及投稿




      RNA pulldown實驗外包服務(wù)樣本要求


      1. 送樣量要求

      樣本類型
      RNA pull down WB建議送樣量RNA pull down MS建議送樣量
      動物細(xì)胞
      3*10e7個細(xì)胞/組(約3個10cm皿)5*10e7個細(xì)胞/組(約5個10cm皿)
      動物組織1g/組2g/組
      植物葉片2g/組4g/組
      植物根或果實4g/組8g/組
      菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組


      ▲注意:這里列出的均為每組樣本的送樣量,如果實驗和對照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細(xì)送樣指南可聯(lián)系輝駿生物客服或銷售索取。

       

      2. 樣本保存和運輸要求:

      (1)樣本用PBS清洗干凈后,離心去掉液體,先放入液氮中速凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱中保存;

      (2)樣本一定要做好標(biāo)記,應(yīng)用油性防凍記號筆或標(biāo)簽紙在管上注明樣本名稱或編號;

      (3)樣本較多或需要分批做,要將樣本分裝;

      (4)干冰取樣/運輸;需要至少在送樣前一天通知我方。





      RNA pull down實驗結(jié)果示例


      RNA pull down實驗技術(shù)服務(wù)結(jié)果

      RNA pulldown WB:Western blot檢測圖(陽性)


      RNA pull down實驗結(jié)果條帶怎么看

      RNA pull-down MS:SDS-PAGE銀染檢測圖


      RNA pull-down實驗原理和步驟及結(jié)果分析

      RNA pull down-MS:質(zhì)譜檢索表格(部分展示)





      RNA pull-down實驗技術(shù)服務(wù)客戶文章


      1. Bao. X.C. et al: The p53-induced lincRNA-p21 derails somatic cell reprogramming by sustaining H3K9me3 and CpG methylation at pluripotency gene promoters.Cell Research.2015, IF=13.9.

      【研究內(nèi)容】:作者通過RNA pull-down、RIP-qPCR、CoIP等技術(shù),證實了lincRNA-p21與HNRNPK結(jié)合,并和甲基化酶SETDB1、DNMT1形成復(fù)合物。該復(fù)合物甲基化了多能性基因的啟動子序列及相應(yīng)組蛋白,并改變了它們的表達(dá)量,從而進(jìn)一步影響體細(xì)胞重編程過程。

      使用相關(guān)技術(shù):rna pull-down、RNA-蛋白相互作用


      2. Bao X.C. et al: Capturing the interactome of newly transcribed RNA. Nature Methods,15(3): 213–220. 2018,IF=28.467.
      【研究內(nèi)容】:輝駿生物為作者單位之一,和客戶共同開發(fā)了一種全新的RNA pull down,并用質(zhì)譜鑒定新生RNA結(jié)合蛋白的方法。該方法主要是用EU標(biāo)記新生RNA,再用點擊反應(yīng)-生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)做RNA-pull down,然后質(zhì)譜鑒定分離的新生RNA互作蛋白。用該rna pulldown方法,首次鑒定到重要周期蛋白CCK1為RNA結(jié)合蛋白。RIP-qPCR、CLIP-Seq等實驗進(jìn)一步證實了CCK1為RBP蛋白,并發(fā)揮著重要的細(xì)胞。
      使用相關(guān)技術(shù):RNA pull down WB、RNA pull-down 技術(shù)服務(wù)


      3. Wang W.T. et al: The lncRNA LAMP5-AS1 drives leukemia cell stemness by directly modulating DOT1L methyltransferase activity in MLL leukemia. Journal of Hematology & Oncology.2020,IF=11.059.
      【研究內(nèi)容】:研究顯示高表達(dá)的LncRNA LAMP5-AS1能降低MLL白血病患者5年生存率。利用RNA pull down配合蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定技術(shù),作者首次發(fā)現(xiàn)LAMP5-AS1和DOT1L蛋白可能形成復(fù)合物。DOT1L是表觀遺傳中非常重要的甲基化酶。作者通過RIP-qPCR進(jìn)一步確定了MLL細(xì)胞存在該復(fù)合物,并通過截短型RNA pull down實驗進(jìn)一步確定了DOT1L的結(jié)合序列。后續(xù)的ChIP-qPCR等實驗證實了該復(fù)合物能有效影響DOT1L對組蛋白H3K79的甲基化水平,從而影響細(xì)胞的增殖分化。
      使用相關(guān)技術(shù):rna pulldown實驗、rna pull down ms、rna pulldown探針


      4. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. Oncogene. 2020,IF=7.971.
      【研究內(nèi)容】:lncRNA LINC01503在鼻咽癌中高表達(dá),并且促進(jìn)了腫瘤的不良預(yù)后。作者在此探討了LINC01503的作用機理,先用RNA pull down和質(zhì)譜鑒定,發(fā)現(xiàn)SFPQ蛋白可能和LINC01503結(jié)合。RIP-qPCR實驗確證了鼻炎癌中LINC01503募集了SFPQ基因?;赟FPQ-FOSL1軸在癌癥研究中的重要地位,作者后續(xù)的工作思路之一也是關(guān)注該信號軸,并設(shè)計了CHIP-qPCR等實驗做出證明。RNA pull down配合質(zhì)譜鑒定,為此文研究提供了關(guān)鍵性的研究源頭。
      使用相關(guān)技術(shù)RNA pulldown實驗、rna-pull down 打質(zhì)譜


      4899+客戶已添加微信獲取實驗優(yōu)惠!


       名稱 貨號 規(guī)格
       貨
      價格
       F2 RNA pull down試劑盒 FI8701(動物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨



      點擊詢價
       FI8711(植物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
       FI8721(微生物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
       生物素RNA pull down試劑盒
       FI8702(動物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨
       FI8712(植物)
       12次/24次/40次 現(xiàn)貨
       FI8722(微生物) 12次/24次/40次 現(xiàn)貨


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      18927549347、13430303037




      F2-RNA pull down試劑盒產(chǎn)品簡介


      輝駿生物自主研發(fā)的 F2-RNA pull-down 試劑盒(專利號:ZL202111160837.9),利用一段只有16nt的RNA標(biāo)簽“F2”與目標(biāo)RNA連接,通過固定在磁珠上的特異性配體與F2標(biāo)簽的強親和力,高效調(diào)取目標(biāo)RNA,同時捕獲與之結(jié)合的蛋白;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。


      輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專利證書,F(xiàn)2-RNA pull down試劑盒-強親和力/操作簡便/周期短/價格低

      輝駿生物FII-RNA pull down試劑盒和方法及其應(yīng)用專利證書




      F2-RNA pulldown試劑盒產(chǎn)品應(yīng)用


      RNA結(jié)合蛋白(RBPs)是一類功能強大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細(xì)胞編碼的所有蛋白的5%-10%。除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨發(fā)揮功能,大部分RNA通過與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來發(fā)揮作用。一方面,RBP參與RNA調(diào)控,另一方面,RNA也會調(diào)控RBPs。以下列舉了可應(yīng)用F2-RNA pull down試劑盒幾個研究方向:

      1. RNA活性、轉(zhuǎn)運、定位調(diào)控;

      2. RNA穩(wěn)定性、翻譯和降解;

      3. RNA合成、可變剪切;

      4. RNA修飾;

      5. RBPs的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用。




      F2-RNA pulldown試劑盒組分


      試劑名稱
      體積(12 Tests)體積(24 Tests)保存條件
      磁珠500 μL1 mL4 ℃
      裂解緩沖液7 mL14 mL4 ℃
      NT2緩沖液32 mL64 mL4 ℃
      RNA結(jié)構(gòu)緩沖液650 μL1.3 mL4 ℃
      漂洗液32 mL64 mL4 ℃
      洗脫緩沖液650 μL1.3 mL-20 ℃
      蛋白酶抑制劑230 μL460 μL-20 ℃
      RNase抑制劑65 μL130μL-20 ℃
      F2配體250 μL500 μL-20 ℃




      F2-RNA pull down試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢

      1、F2標(biāo)簽是一段RNA序列,可以連接和標(biāo)記各種類型的RNA;

      2、F2標(biāo)簽很短,只有16nt,幾乎不影響目標(biāo)RNA的結(jié)構(gòu)或功能;

      3、可以用于體內(nèi)或體外標(biāo)記目標(biāo)RNA;

      4、F2標(biāo)簽與其特異性配體具有很強親和力,能夠高效調(diào)取F2-RNA及其結(jié)合蛋白。

      F2-RNA pull-down試劑盒-強親和力-蛋白結(jié)合性好.png




      生物素RNA Pull down試劑盒簡介


      RNA pull-down是檢測RNA及其結(jié)合蛋白(RNA binding protein,RBP)之間相互作用的主要實驗手段之一。生物素-RNA pull down試劑盒利用體外轉(zhuǎn)錄的生物素標(biāo)記RNA來模擬天然RNA分子,作為探針,與樣本裂解液孵育,探針與裂解液中的蛋白形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物;通過鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強親和力,特異性捕獲生物素標(biāo)記的RNA,從而實現(xiàn)RNA結(jié)合蛋白(RBPs)的捕獲富集;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。




      生物素RNA pulldown試劑盒組分


      試劑名稱
      體積(12 Tests)體積(24 Tests)保存條件
      鏈霉親和素磁珠500 μL1 mL4 ℃
      裂解緩沖液7 mL14 mL4 ℃
      NT2緩沖液16 mL32 mL4 ℃
      RNA結(jié)構(gòu)緩沖液650 μL1.3 mL4 ℃
      漂洗液32 mL64 mL4 ℃
      洗脫緩沖液650 μL1.3 mL-20 ℃
      蛋白酶抑制劑230 μL460 μL-20 ℃
      RNase抑制劑65 μL130μL-20 ℃


      標(biāo)簽:

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