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      服務介紹

      lncRNA和circRNA通常被認為是非編碼RNA,但是越來越多的研究表明,有些lncRNA和circRNA也能編碼多肽或蛋白,且部分多肽還具有重要的生理功能。為了系統(tǒng)的研究具有多肽或蛋白編碼功能的lncRNA或circRNA,我司制定了能快速準確篩選它們及探究其產(chǎn)物功能的個性化解決方案。


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      lncRNA或circRNA編碼多肽-技術原理


      編碼蛋白的RNA有開放閱讀框(ORF),翻譯時會與核糖體結合,產(chǎn)生對應的多肽或蛋白產(chǎn)物,通過分離核糖體-RNA復合物,對RNA進行測序,lncRNA/circRNA分析,ORF預測,可以預測其編碼的多肽或蛋白信息;之后分離樣本中的蛋ncRNA或circRNA編碼多肽白質進行質譜測定,獲得實際的多肽或蛋白信息;將以上兩種信息進行匹配,即可篩選到具有多肽或蛋白編碼功能的lncRNA/circRNA信息;之后可對這些RNA進行表達驗證、編碼驗證和功能研究。




      lncRNA或circRNA編碼多肽技術服務流程


      確定差異表達的lncRNA/circRNA

      ? RNA-seq篩選      

       ? qPCR,northern blot或原位雜交驗證


      篩選有編碼潛能的lncRNA/circRNA

      ? 分析潛在ORF及ORF相關信息

      ? 其他相關生物信息分析


      質譜確認

      ? 以目標RNA建庫,樣本做LC-MS和PRM,找到lncRNA/circRNA編碼多肽/蛋白的質譜證據(jù)


      編碼肽表達檢測

      ? 體外檢測:構建帶標簽的ORF/ORFmut載體,轉染細胞后用標簽抗體檢測

      ? 體內檢測:野生型細胞/組織樣本,以小肽抗體檢測


      編碼肽功能檢測(排除 RNA作用)

      ? 小肽表達水平檢測,分析其與表型的關系

      ? 體外檢測:ORF/ORFmut載體轉入原本低/不表達lncRNA的細胞,檢測功能/表型變化;也可做沉默實驗

      ? 體內檢測:小鼠體內過表達ORF/ORFmut,檢測功能表型變化;也可做敲除實驗





      lncRNA或circRNA編碼多肽輝實驗*輝駿生物技術優(yōu)勢


      ★差異RNA或有編碼潛能的RNA數(shù)據(jù)庫的建立可以幫助我們更快的確定分析目標;

      質譜分析方法可以批量獲得很多具有編碼潛能的lncRNA和circRNA信息,為后續(xù)研究鑒定堅實基礎,節(jié)省科研時間和精力。

       



      lncRNA或circRNA編碼多肽研究-文章


      1. Novel Role of FBXW7 Circular RNA in Repressing Glioma Tumorigenesis. JNCI J Natl Cancer Inst. 2018.【IF>10,合作伙伴文章】

      2. A micropeptide encoded by a putative long noncoding RNA regulates muscle performance. Cell. 2015.【IF>30】

      3. A peptide encoded by a transcript annotated as long noncoding RNA enhances SERCA activity in muscle. Science. 2016.【IF>30】

      4. Circ-ZNF609 Is a Circular RNA that Can Be Translated and Functions in Myogenesis. Mol Cell. 2017.【IF>15】

      5. Translation of CircRNAs. Mol Cell. 2017.【IF>14】

      6. Extensive translation of circular RNAs driven by N6-methyladenosine. Cell Res. 2017.【IF>15】



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